【作用与用途】 用于疑似非洲猪瘟血液/组织样品中非洲猪瘟病毒 DNA的检测。

【用法与判定】

1 用法

1.1 待检样品采集、保存及运输

1.1.1 样品采集：采集脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体等组织；待检活

畜，采集血液。

1.1.2 样品保存：采集的样品在 2~8 ℃保存应不超过 1 周，-70 ℃条

件下保存，避免反复冻融。

1.1.3 样品运输：泡沫箱加冰袋后密封进行运输。

1.2 样品处理

取全血 2 µL 加入 RNase/DNase-free 1.5 mL 离心管中，加入反应液 A

20 µL，混匀，室温(20℃左右)静置 3 分钟，加入反应液 B 20 µL，混匀后

即为待检核酸 DNA 溶液。

1.3 荧光 PCR 反应

1.3.1 计算当次实验所需要的反应数（每次实验需预留 2 管做阳性对

照和阴性对照），从冰箱取出试剂盒中的 PCR 反应条（内含 PCR 反应缓

冲液和酶液），PCR 反应条中的白色成分为隔离剂，室温条件下不溶，

待隔离剂下层溶液融化（室温约 5 分钟），用掌上离心机瞬时离心，将

PCR 反应管转移至样本处理区。

1.3.2 将待检核酸 DNA 溶液 5 µL 加入 PCR 反应管侧壁，切勿将吸

头插入隔离剂。在预留的阳性对照管中加入阳性对照品 5 µL，在预留的

阴性对照管中加入阴性对照品 5 µL，终体积 25 µL/管。盖好荧光 PCR 反

应管盖，用掌上离心机瞬时离心，转移到荧光 PCR 仪器上。