针对o型口蹄疫病毒的免疫血清抗体的单克隆抗体及其应用
技术领域

1.本发明涉及动物病毒学与动物传染病学检测技术领域，特别涉及针对o型口蹄疫病毒的免疫血清抗体的单克隆抗体。兰兽研口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒

背景技术：
2.口蹄疫(foot and mouth disease，fmd)是由口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus，fmdv)感染引起的偶蹄动物(猪、牛、羊、骆驼等)共患的急性、热性、接触性传染病，该病被世界动物卫生组织(oie)列为a类传染病之首，对畜牧业生产的危害极大，消灭和控制口蹄疫是各国政府共同关注的世界性问题。我国对口蹄疫的控制和扑灭，主要措施是强制免疫。目前，广泛使用的口蹄疫疫苗以灭活苗和合成肽疫苗使用得最多。口蹄疫疫苗免疫主要诱导中和抗体的产生，安全有效的疫苗是成功预防、控制乃至最终消灭口蹄疫的先决条件。
3.血清学检测是对血清中的特异性抗体进行定性或定量鉴定，在口蹄疫诊断检疫及动物群体口蹄疫疫苗效力评价中应用最为广泛。病毒中和试验是最为经典的口蹄疫血清学诊断方法，但是该试验存在动用活毒，操作时间长，试验结果难重复的缺点。从1986年发展起来的液相阻断elisa(lpb)由于其快速、重复性好、不动用活毒，成为了病毒中和试验的替代方法，但其也存在假阳性率高，不能检测多肽疫苗免疫背景的血清抗体等缺点。固相竞争elisa方法(spc)除了具有液相阻断elisa方法(lpb)的优点外，其特异性更好，操作更为简便，结果更稳定，容易重复，2004年被世界动物卫生组织(oie)确立为国际贸易中口蹄疫血清学检测指定方法之一。
4.口蹄疫病毒易变异，现已确定有7个病毒血清型，o、a、c型(即欧洲型)，sat1、sat2、sat3(南非1，2，3型，即非洲型)和asiaⅰ(亚洲ⅰ型)。这7个病毒血清型间无交叉反应，各血清型又包括不同的变异型。fmdv的抗原位点研究表明，结构蛋白vp1、vp2、vp3、vp4均参与抗原位点的构成。o型口蹄疫病毒的抗原位点主要位于结构蛋白vp1上，vp1是诱导动物产生中和抗体的主要成分，其中141～160、200～213位氨基酸肽段能够保护动物抵抗病毒攻击，是重要的b细胞抗原表位，也是o型口蹄疫病毒疫苗免疫和诊断方法建立重要的靶标。
5.现有技术中，例如cn114921418a提供了一株o型口蹄疫类病毒颗粒单克隆抗体的杂交瘤细胞株1d3及试剂盒和检测方法，该方法能检测出o型口蹄疫类病毒颗粒疫苗免疫血清抗体，用于区分o型口蹄疫野毒、全病毒灭活疫苗和类病毒颗粒疫苗免疫血清。又例如cn106405092a提供的一种基于型特异性单抗的o型口蹄疫病毒抗体固相竞争elisa试剂盒，试剂盒中含有hrp标记的o型口蹄疫特异性单抗。又例如cn109799342a提供的一种o型口蹄疫病毒抗体竞争elisa检测试剂盒，使用由o型口蹄疫病毒的结构蛋白vp0、vp1和vp3组装而成的o型口蹄疫病毒样颗粒免疫兔子，分离获得的竞争性抗体用hrp直接标记。然而，上述现有技术均采用的是常规的单克隆抗体筛选方法，没有提供目前市售各类口蹄疫o型疫苗免疫血清的检测效果，无法对现售疫苗的免疫效果进行评价。