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猪场病毒核酸提取常见问题解答

发布时间:2022-11-22 09:07:38人气:7

1、对于环境样品含有太多杂质(泥沙、唾液样品里面含有饲料杂质)会对结果产生多大影响?否可以在裂解之前对样品进行离心-次?这种离心操作会对检测结果产生影响吗?

对于杂质较多的样本,建议在提取前进行离心,取上清液进行提取,尽量不要取到其他杂质。如果含有过多杂质,对于磁珠法试剂盒,有可能会对核酸的纯度有影响,比如洗脱液有颜色的情况;对于柱式法试剂盒,有可能会出现纯化柱被堵塞的情况。样品前处理环节进行离心,不会对检测结果产生影响。 非洲猪瘟荧光PCR检测试剂盒

2、针对很脏的环境拭子样品、 精液样品和痰液样品有好的解决方案吗?

样本前处理要按说明书规范进行, 对于很脏的的环境拭子和精液样本,建议先离心,取上清液或精清样本进行提取;痰液样本,可直接取样进行提取,若太粘稠,建议用生理盐水或专用样本稀释液进行稀释后,再进行提取;提取试剂盒的选择:建议选择裂解效果好、提取效率高的病毒核酸提取试剂盒。

3、广纯化柱法提取核酸时,尤其是提取血液时,纯化柱可能会被红细胞堵塞,能否把原血液样品离心一次,用血浆来检测核酸吗?

有数据显示,同- -份血液样本,从全血样本提取的Ct值要比从血清提取的Ct值要小。所以还是更推荐从全血样本中进行提取、检测。

对提取血液样本会出现纯化柱堵塞的现象,如果没有取到血凝块的话,初步分析是所用试剂盒对血液的裂解效果偏弱的原因。建议可以换一款裂解效果更好的试剂盒进行提取,比较推荐明日达的病毒DNA提取试剂盒( V型)。这款试剂盒的裂解液和结合液均具有裂解作用,加之蛋白酶对蛋白的消化裂解的作用,可以很好地胜任各种血液样本的提取, 甚至是有凝血现象的全血。

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4、不同的样品,是否需要采用不同的核酸提取方法?如环境样品,血拭子等。

不同类型的样本按照各自的前处理方式完成样本前处理之后,可以采用同样的核酸提取方法进行提取。因为,一款合格的病毒核酸提取试剂盒 应该满足各种不同样本类型的提取。

5、油性疫苗如果要检测非洲猪瘟病毒 ,有没有好的前处理方法 ?

对于疫苗样本,可以用生理盐水进行稀释,也可以用专门的裂解液进行稀释处理,然后再进行提取。我们曾做过测试,用明日达的预分装提取试剂盒对油性疫苗直接进行提取,提取效果也是没有问题的。


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