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OP液的采取及人员防护措施

发布时间:2022-11-19 09:10:01人气:26

牛羊O-P 液的采集是开展动物口蹄疫病原学监测的一项重要技术内容,O-P 液采集主要适用于牛、羊、猪体型大的偶蹄类动物。动物采集食道-咽部分泌物(O - P 液),可以评估家畜免疫抗体水平,掌握群体免疫状况;了解口蹄疫病原的分布状况及高风险区域的发病情况,追踪口蹄疫病毒变异趋势。

采集技术需要在充分理解的基础上进行操作,通过实际操作发现问题,及时解决问题。切实掌握O-P液采集技术,为以后顺利完成重大动物疫病防控过程中的样品采集工作打下基础。O-P 液采集前需要掌握的知识有保存液的配制,采样工具准备、采集方法、采集时注意事项及采集后样品的保存。牛羊OP液采样器

(一)O-P 液的采取

1. 配置试剂。

(1)所需试剂的配制10.1 mol/LPBS 液:氯化钠80 g,氯化钾2.0 g,磷酸氢二钠30.0 g,磷酸二氢钾2.0g,蒸馏水1000.0 ml ;0.04 mol/L、pH7.4 磷酸盐缓冲液: 0.1 mol/LPBS 液400ml, 蒸馏水600 ml。

(2)所需试剂的配制0.5% 水解乳蛋白/Earle’液: 氯化钠6.8 g,氯化钾0.4 g,氯化钙0.2 g,硫酸镁0.2 g,磷酸二氢钠0.14 g,葡萄糖1.0 g,10% 酚红2.0 g, 水解乳蛋白5.0 g,加双蒸馏水1 000.0ml。按配方称取各成分并逐个溶解,最后加双蒸馏水1 000 ml,过滤除菌,或69 kpa 高压蒸汽灭菌15 min,室温或4℃保存。

2. 采样所需器材。金属探杯、灭菌广口瓶(或20 ml 大离心管)、采样箱、记号笔、标签、封口膜、一次性手套、口罩。

3. 采样所需试剂。生理盐水、0.2% 柠檬酸或2%氢氧化钠、细胞培养液(0.5% 水解乳蛋白-Earle液)或磷酸盐缓冲液(0.04 mol/l 、pH7.4)。

4. 样品采集方法。采样时动物呈站立保定,将探杯随吞咽动作送入食道上部10 ~ 15 cm 处,轻轻来回拉动2 ~ 3 次,然后将探杯拉出。如采集的O-P 液被反刍胃内容物严重污染,要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。

5.样品保存。将探杯采集到的4 ~ 6 ml O-P 液倒入20 ml 以上的灭菌玻璃容器或离心管中, 容器中应事先加有4 ~ 6 ml 细胞培养液(0.5% 水解乳蛋白-Earle 液)或磷酸盐缓冲液(0.04 mol/L、pH7.4),加盖密封后充分摇匀,贴上防水标签,并写明样品编号、采集地点、动物种类、时间等,尽快放入装有冰块的冷藏箱内,然后转往-20℃冰箱冻存。通过病原检测,做出追溯性诊断。

6.样品采集时注意事项。

(1)动物站立保定,充分保定后方可采样品,防止刮伤动物食道。

(2)被检动物在采样前禁食(可饮少量水)12 h,以免胃内容物反流污染O-P 液。

(3)采样探杯在使用前需要在0.2% 柠檬酸或1% ~ 2% 氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5 min,再用与动物体温一致的清水冲洗探杯后使用。

(4)每采完一头动物,探杯要重新进行消毒并充分冲洗。防止相互产生感染。

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(二)采样人员的防护注意事项

1.要使用合格的防护用品(合格的医用防护用品)。

2.要反复不断的对工作人员进行安全防护技术培训,提高安全防护意识,养成良好的防护习惯。

3.要定期对工作人员进行健康体检,早发现,早治疗,做到防患于未然,减少感染几率。

4.从工作人员进入现场抓牛、采样、登记、运送样品等一系列操作及监测阳性畜的隔离、集中,阳性畜的运送,等过程要无害化处理。

5.穿戴防护用品。穿戴个人防护用品要按实验室的要求、顺序进行。穿戴顺序首先戴口罩、防护眼镜、戴防护帽、第一层手套,然后穿防护服或工作服,最后穿鞋套或胶鞋,戴第二层手套并将手套套在防护服袖口外面。卸载顺序,摘下外层手套、摘下防护眼镜、脱掉防护服、摘掉防护帽、脱掉鞋套或胶鞋、摘下口罩、摘下内层手套。防护服、口罩、防护眼罩、防护帽、脚套、手套(两层)等一次性防护用品使用后要集中销毁,可以重复使用的要经过灭菌后再使用。

6.避免手套的触摸“污染”,工作中戴手套的手避免触摸鼻子、面部,揉眼睛。

7.严禁在工作场地吃东西,抽烟,喝水,化妆,打手机等,与工作无关的操作。

8.接触所有可能污染的东西时,一定要戴手套。


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